三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基TSI檢測原理結(jié)果操作方法技術(shù)應(yīng)用問題

㈠三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基檢驗(yàn)檢測基本原理

三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基（TSI）用來技術(shù)鑒定腸道細(xì)菌進(jìn)行發(fā)酵蔗糖/乳糖/葡萄糖并形成硫化氫的生化反應(yīng)。蛋白胨和牛肉浸出粉提供了氮源/維生素和礦物質(zhì)；乳糖/葡萄糖和蔗糖是可進(jìn)行發(fā)酵的糖。當(dāng)它們形成產(chǎn)出酸時(shí)，用酚紅指示劑測定方法，酸度為黃色，而堿度為紅色。硫代硫酸鈉能夠被某些細(xì)菌轉(zhuǎn)變成硫化氫，與硫酸亞鐵中的鐵鹽形成黑色硫化鐵。保持氯化鈉的穩(wěn)定平衡滲透壓；它是瓊脂培養(yǎng)基的凝固劑。

⑴TSI三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基試管的三糖為葡萄糖/乳糖/蔗糖，葡萄糖的含量僅為乳糖或蔗糖的十分之一。當(dāng)細(xì)菌病毒分解掉糖原類時(shí)，產(chǎn)酸會(huì)減少酸堿值，斜面和底層會(huì)有些發(fā)黃:

①要是細(xì)菌病毒只分解掉葡萄糖而不分解掉乳糖和蔗糖，中海生物考慮到葡萄糖的含量低，形成的少量酸與空氣接觸到會(huì)被氧化，在細(xì)菌病毒生長發(fā)育繁衍操作過程中會(huì)借助含氮物質(zhì)轉(zhuǎn)化成堿性化合物實(shí)現(xiàn)中和，使斜面重新變紅；考慮到底層仍處于缺氧狀態(tài)，細(xì)菌病毒分解掉葡萄糖形成的酸暫時(shí)性不被氧化，始終保持黃色。

②要是細(xì)菌病毒能分解掉葡萄糖、乳糖和蔗糖，形成大量的酸，則斜面和底層為黃色。

③要是細(xì)菌病毒沒辦法進(jìn)行發(fā)酵糖，斜面和底層也不會(huì)變色，反倒是會(huì)變紅。

⑵細(xì)菌病毒分解掉葡萄糖、乳糖或蔗糖，一起形成酸和氣體，試管便會(huì)產(chǎn)生故障問題。

⑶細(xì)菌病毒形成的硫化氫會(huì)與培養(yǎng)基中的硫酸亞鐵產(chǎn)生反應(yīng)，形成黑色硫化鐵，生成黑色范圍。

㈡TSI培養(yǎng)基檢驗(yàn)結(jié)果顯示判定

中海三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基TSI檢驗(yàn)結(jié)果有以下四種顯示狀態(tài):

⑴斜面紅色/底層紅色：葡萄糖/乳糖和蔗糖沒辦法進(jìn)行發(fā)酵，它是非發(fā)酵菌的基本特征（銅綠假單胞菌）。

⑵斜面紅色/底層黃色：進(jìn)行發(fā)酵葡萄糖而不是乳糖/蔗糖是非進(jìn)行發(fā)酵乳糖細(xì)菌病毒的基本特征（志賀氏菌）。

⑶斜面紅色/底層黃色，部分范圍黑色：葡萄糖進(jìn)行發(fā)酵但乳糖和蔗糖不進(jìn)行發(fā)酵，一起形成硫化氫，它是形成硫化氫和無乳糖細(xì)菌病毒的基本特征（沙門氏菌\亞利桑那菌\檸檬酸桿菌\變形桿菌）

⑷斜面黃色/底層黃色：進(jìn)行發(fā)酵葡萄糖、乳糖和蔗糖是乳糖進(jìn)行發(fā)酵大腸菌群的基本特征(大腸桿菌、克雷伯氏菌和腸桿菌)

㈢三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基使用操作方法

稱量本產(chǎn)品六十四點(diǎn)五克，進(jìn)行加熱溶化于一千毫升蒸餾水中，燒開一分鐘左右，裝進(jìn)十六毫米乘一百五十毫米的試管中，在一百二十一攝氏度高壓滅菌消毒十五分鐘左右，制造而成高層斜面。

㈣TSI培養(yǎng)基技術(shù)應(yīng)用

重點(diǎn)做為雞白痢沙門氏菌的分離鑒定及滅活疫苗研發(fā)。為預(yù)防雞白痢沙門氏菌病，中海生物從疫源地分離鑒定的雞白痢沙門氏菌強(qiáng)毒株被研發(fā)成油乳劑滅活疫苗和蜂膠滅活疫苗。

㈤三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基需注意的問題

查驗(yàn)形成硫化氫的異常細(xì)菌病毒時(shí)，應(yīng)立即觀測檢驗(yàn)結(jié)果顯示，避免轉(zhuǎn)化成的硫化鐵形成黑色范圍，蓋坡和底層的顏色會(huì)直接影響對檢驗(yàn)結(jié)果顯示的判定。

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